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病理技術切片方法

2017-01-11 10:58:23 admin 79

  切片的第一步必需粗切。粗切的厚度大約在50~100微米左右,質地較硬的組織或較小的組織應再薄一些,粗切致組織全部暴露後,才進行細切。細切至組織塊表麵均勻一致,無白點後,再把切的蠟片放入溫水中。切片時要求用力均勻、柔和,搖速不易過快或過慢。過快會導致切片厚薄不均,機器磨損;過慢會使切片增厚。切片厚度一般為3~5微米。切片的要求是完整、薄、均勻。切下的片膜其大小形狀應與組織塊一致,切片的不完整,常會將重要病變遺漏,導致誤診、漏診。在切片放蠟塊時,應注意組織包埋的方向,組織的層次,纖維、肌肉等的走向應與切片刀平行,較難切的部分應放在上麵,如皮膚的表皮,腫塊的包膜,胃腸道的漿膜等,這樣可以減少組織的斷裂現象。操作切片機時應用力均勻,避免用力過重。對脫鈣組織、骨髓,以及已知的鈣化組織,應選用固定的刀口,以減少某他部位出現缺口的可能性。在使用毛筆展片時要防止筆絲進入刀口,因為每切到一根筆絲,就會增加一個缺口。切片厚度一般為4~6微米,有人認為:隻要Slee切片機刻度標著幾個微米,切出來的片子就是幾個微米。其實不然,當切片刀不鋒利,或切片時速度不勻,或切的較慢時,切的片子都會變厚,隻有在切片刀十分鋒利、切片勻速的情況下,才能真正保證其厚度。下麵是切片時碰到的問題的原因及可能處理的方法:

  (1)組織發脆:一般是脫水、透明、浸蠟時間過長、溫度過高,並與組織本身質地也有關,在切片時,邊切邊用嘴向蠟片吹氣,可能會好些。

  (2)切片卷起,可能是刀不鋒利,或刀鋒在另一麵,或刀角度過大,切片太厚等等。

  (3)蠟片彎曲:可能是刀鋒不均,切片刀未磨直,切片刀與蠟塊不平行。

  (4) 透明、浸蠟時間過長、溫度過高,並與組織本身質地也有關。

  (5)厚薄不均:可能是刀、刀座及蠟塊未夾緊,組織太硬,或切片機主軸太向前,或切片機已磨損。

  (6)切片出現裂痕:可能是刀有缺口,石蠟內有雜質,組織內有鈣化、骨片或有線結, 也可能會有棉紙纖維等。

  (7)切片不連片,切不下片,切片很厚,或者切片後蠟塊發白,內陷:組織脫水不佳。

  補救辦法:可先將蠟塊溶解,取出組織,放入加熱水浴的丙酮內(80℃),30~60分鍾,再進行透明浸蠟包埋切片,也許會好一點。平時切片中碰到一些處理不好的標本(組織脫水或者是浸蠟不充分)和難切的蠟塊時,在切片時很容易卷起或切出是碎片,出現這樣的情況就很難撈片。

  在這裏給大家介紹一種方法可以克服這個問題。把載玻片盒子裏的隔離紙撕成和蠟塊大小的麵積(普通的薄紙也可以),粘點水貼在已經修好片的蠟塊上,再切,紙片上就已經粘上了你要切的片子了,直接拿出紙片反向放入漂片機內漂平即可,在切片是散片的情況下應注意嚴格控製水溫,不宜太高。有些老師整天就用此法切片。但這也是我一直反對的做法,原因不在於此法的本身,而在於處理問題的一個思路,有的技術員因有了此法,再不考慮如何將脫水不好的組織處理好,反正有辦法應付,這樣做出來的片子肯定沒有脫水好的組織質量好。所以要求將重點放在組織處理上。隻要組織全部處理好了,這方法也就沒用了。

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